Concurrí yo solo porque Leonel estaba ganando el modelo iberoamericano de naciones unidas (felicitaciones campeon). En este día profundizamos mas lo que habiamos visto en el dia 3.
Este dìa se mostrò como se revela el westen blot.
La membrana con la transferencia realizada el dia 3, fue cortada en dos e incubada con un anticuerpo primario que reconoce la proteìna MAGE (abajo) y un anticuerpo primario que reconoce la proteìna ACTINA.
El anticuerpo secundario utilizado estaba conjugado a la peroxidasa HRPO. La reacciòn de luminiscencia se llevò a cabo mediante la incubaciòn de las membranas con los sustratos de la peroxidasa: H2O2 y Luminol, dos minutos antes de revelar. La peroxidasa con el H2O2 oxida el luminol, que emite luz. La intensidad de esta luz fue medida en un luminòmetro adaptado a la lectura de membranas de western blot.
La figura muestra la imagen obtenida por este metodo. La ACTINA tiene una intensidad constante en todas las calles, mientras que MAGE varia en intensidad entre las distintas muestras.
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