jueves, 17 de julio de 2008

Dia 8

Realizamos un control para determinar si el vector que habiamos purificado era realmente el que esperabamos, MageB2.
Utilizamos el programa nebcutter para analizar las enzimas de restricciòn que corta esa secuencia y observamos que la digestion con HindIII debia dar un patron de bandas determinado: 4500pb, 500pb, 300pb y 200pb.

La digestiòn con HindIII se realizò en un volumen total de 20ul, en el buffer indicado por el catalogo, 1 ul de enzima HindIII y 1microgramo de vector. Luego de 1 hora a 37 grados consideramos finalizada la reacciòn de digestiòn.

Luego de la digestiòn con esta enzima realizamos una corrida electroforètica en geles de agarosa y obtuvimos el patròn de bandas esperado mediante la estimaciòn de la dimesion de las bandas por comparacion con pesos moleculares estàndard.

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