jueves, 17 de julio de 2008

Dia 6


En el dia de la fecha realizamos una digestion del DNA de MageA6 y MageA4 con la enzima de restricciòn HindIII; luego corrimos en un gel de agarosa para visulizar los productos de la digestion.
El dia 5, mediante la utilizaciòn de un programa de informàtica que detecta los sitios de las enzimas de restricciòn, observamos que MageA6 tenia un sitio para HindIII que no se encontraba completa en MageA4. Las secuencias de ambos genes son muy similares, y observamos que MageA4 tiene una sola base de diferencia en el sitio de corte de HindIII: la secuencia correcta en MageA6 es AAGCTT, mientras que en MageA4 la secuencia es AAGCCT. Quisimos comprobar la especificidad de esta enzima digiriendo vectores que donde estan clonados estos genes. El producto de la digestiòn de MageA4 y MageA6 con HindIII, fue verificado en una electroforesis en gel de agarosa: Si HindIII corta en su sitio, esperamos ver una banda de 600 bases, sino corta se observa el vector correspondiente sin producto de digestiòn.En la figura de abajo se muestra la comparaciòn entre ambas secuencias mediante la alineaciòn de MageA6 (abajo) y MageA4. Se senala la diferencias en el sitio de corte HindIII

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